Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 2:22 min. • July 8th, 2025
Comece com uma placa de imagem à base de vidro contendo uma suspensão de neutrófilos humanos - ou células imunológicas e visualize-a sob um sistema de imagem de fluorescência.
Introduza conídios repórteres de Aspergillus fluorescentes geneticamente modificados - ou esporos de fungos, e capture imagens em intervalos regulares de até 6 horas.
Os esporos do fungo expressam proteínas fluorescentes vermelhas e são marcados externamente com fluoróforos magenta não degradáveis - ajudando a distinguir as células mortas das vivas.
Durante a incubação, os neutrófilos interagem com moléculas associadas a patógenos nos conídios por meio de receptores de reconhecimento de padrões, facilitando seu engolfamento dentro de um fagossomo.
Mais tarde, o fagossomo se funde com o lisossomo contendo enzima, formando um fagolisossomo.
Dentro do fagolisossomo, as espécies reativas de oxigênio e as enzimas degradam os conídios.
Durante a imagem de células vivas, no ponto de tempo inicial, a fluorescência vermelha e magenta intensa dentro do fagossomo dos neutrófilos indica a presença de conídios vivos.
Com o tempo, uma diminuição na fluorescência vermelha com a retenção da fluorescência magenta indica a deg
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