Um ensaio de base molecular para quantificar os vírus influenza A e B
Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 3:49 min. • July 8th, 2025
Pegue um sistema de detecção molecular contendo um receptor de amostra pré-cheio, um cartucho de transferência e uma base de teste.
A base de teste possui tubos de reação contendo primers T1 e T2 com locais de corte e regiões de reconhecimento de influenza A e B, uma mistura de enzimas e balizas moleculares com um fluoróforo e um atenuador.
Transfira as amostras nasofaríngeas contendo vírus em um tampão de lise do receptor de amostra para a base de teste.
A lise viral libera RNA, seguida pela ligação do primer T2 à região alvo do RNA e extensão pela transcriptase reversa.
O outro primer T2 se liga ao mesmo RNA - deslocando a fita inicialmente estendida.
O primer T1 se liga à fita deslocada e a DNA polimerase a estende. Uma enzima de corte corta seu local, com polimerização e deslocamento da fita, formando DNA de fita dupla.
O processo continua, amplificando duplex com saliências de fita simples.
As balizas moleculares interagem com as saliências, separando o fluoróforo do supressor e produzindo fluorescência para quantificar a Influenza A e B.
Para iniciar o processo de teste, toque em Executar teste na tela do instrumento. Em seguida, insira o ID do paciente usando o teclado na te
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