Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 5:52 min. • July 8th, 2025
Pegue câmaras de fluxo pré-montadas conectadas a sistemas de fluxo com filtros transwell: uma com uma monocultura endotelial na parte superior e outra com uma cultura endotelial na parte superior e células estromais na parte inferior.
Ambas as câmaras são pré-tratadas com uma citocina pró-inflamatória.
Em uma monocultura, as citocinas ativam as células endoteliais, regulando positivamente a expressão da molécula de adesão.
No entanto, a conversa cruzada entre células estromais e endoteliais na co-cultura leva as células estromais a produzir mediadores reguladores que regulam negativamente a resposta das células endoteliais às citocinas pró-inflamatórias.
Posicione a câmara em um microscópio de contraste de fase invertido.
Introduza uma suspensão de neutrófilos.
Os neutrófilos são recrutados e se ligam às moléculas de adesão endotelial por meio de interações adesivas transitórias, facilitando sua interação com quimiocinas ligadas à superfície e rolando ao longo do endotélio.
Essa interação ativa as integrinas nos neutrófilos, estabilizando a adesão e resultando na transmigração através das células endoteliais.
No entanto, na co-cultura, a resposta endotelial regulada negativamente r
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