Um ensaio de aderência de fase sólida para avaliar a formação de biofilme

Pegue uma placa de fundo plano com vários poços contendo bactérias em meios de crescimento ou bactérias em meios de crescimento suplementados com sal biliar.

Os sais biliares induzem estresse, causando danos celulares e liberando DNA e proteínas. Essas biomoléculas revestem o fundo do poço, permitindo que as bactérias sobreviventes adiram à superfície sólida.

As bactérias ligadas se multiplicam, formando microcolônias e produzindo autoindutores - ou moléculas de sinalização química, permitindo a comunicação bacteriana.

Essa comunicação faz com que as bactérias colonizem e iniciem a produção de substâncias poliméricas extracelulares ou EPS, gerando um biofilme.

Após a incubação, remova o meio para eliminar as bactérias flutuantes.

Introduza uma coloração violeta cristalina que interaja com o peptidoglicano da parede celular bacteriana, dando-lhe uma cor violeta.

Remova o excesso de mancha e seque. Cubra com etanol para solubilizar o cristal violeta da parede celular bacteriana, alterando a cor da solução.

Uma coloração mais intensa em poços tratados com sais biliares do que em poços não tratados confirma a formação de biofilme por meio da adesão à fase sólida.

Primeiro, rotule dois