Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 2:49 min. • July 8th, 2025
Comece com uma placa de vários poços contendo um biofilme bacteriano - bactérias encapsuladas na substância polimérica extracelular protetora ou EPS.
Aspire o meio para remover as bactérias não aderentes e lave.
Trate os alvéolos contendo biofilme apenas com tampão, tampão com glicose, tampão com sais biliares ou tampão com glicose e sais biliares.
Os tratamentos com tampão e glicose suportam a liberação de enzimas bacterianas que degradam o EPS do biofilme.
Isso resulta na desmontagem do biofilme, liberando as bactérias.
Enquanto os sais biliares e uma combinação de sais biliares e tratamentos com glicose imitam as condições de estresse e retêm bactérias dentro do EPS protetor.
Transfira o sobrenadante de cada poço para uma nova placa de vários poços.
Localizar sobrenadantes diluídos em placas de ágar e incubar.
Enumere as colônias bacterianas e determine a dispersão bacteriana para cada tratamento.
Uma maior dispersão com tratamentos tampão e glicose em comparação com os tratamentos com sais biliares indica a desmontagem do biofilme.
Registre os valores de OD600 da placa de biofilme durante a noite no leitor de placas, colocando o controle em branco. Em seguida, aspirar o meio de
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