Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 3:52 min. • July 8th, 2025
Veja o hipocampo de embrião de rato.
Adicione tripsina. Incubar para mediar a quebra da matriz tecidual, afrouxando as células do hipocampo.
Diluir com um tampão. Incubar para digestão enzimática contínua com tripsina.
Em seguida, transfira a massa de tecido para um tubo contendo meio. Pipetar repetidamente para dissociação mecânica em células individuais.
Células-semente em lamínulas revestidas de poli-L-lisina dentro de placas de cultura.
incubar. As células do hipocampo aderem às superfícies revestidas. Os neurônios desenvolvem uma lamela e estendem neuritos menores.
Além disso, os neuritos crescem com processos axonais e dendríticos, formando uma rede neuronal.
Os neurônios maduros expressam receptores excitatórios sinápticos, receptores N-metil-D-aspartato ou NMDARs.
Após a incubação, lave as lamínulas com meios.
Adicione um soro diluído para pacientes com encefalite autoimune. Os autoanticorpos se ligam a NMDARs neuronais.
Lave com tampão e depois fixe as células.
Adicione anticorpos secundários marcados com fluoróforo que se ligam aos autoanticorpos ligados ao NMDAR.
Lave com tampão. Coloque a lamínula sobre a mídia de montagem contendo DAPI para manchar os núcleos.
Observe
Veja a transcrição completa e aceda a milhares de vídeos científicos