JoVE Encyclopedia of Experiments
Imunologia
0 vistas • 2:39 min • July 8th, 2025
Pegue células de câncer de próstata e injete-as por via subcutânea em um camundongo nu anestesiado e imunocomprometido.
A falta de uma resposta imune permite que as células injetadas sobrevivam e se multipliquem, formando um tumor.
As células tumorais superexpressam um antígeno de membrana específico da próstata ou PSMA, uma proteína da superfície celular.
Pegue anticorpos específicos para PSMA conjugados a um radiotraçador e injete-os por via intravenosa na cauda do camundongo portador do tumor.
Os anticorpos atingem as células tumorais e se ligam ao PSMA, marcando o tumor.
Coloque o camundongo anestesiado em uma tomografia por emissão de pósitrons ou scanner PET e obtenha uma varredura.
A imagem produzida mostra a distribuição do radiotraçador, destacando áreas de alta captação de anticorpos, que correspondem à localização do tumor.
Em camundongos machos atímicos nus, implante subcutaneamente 5 x 106 células de câncer de próstata LNCaP, permitindo que elas cresçam para um xenoenxerto de 100 a 150 milímetros cúbicos. Três a quatro semanas após a inoculação, os tumores devem estar prontos.
Para exames de imagem, diluir o radioconjugado 89Zr-DFO-J591 a uma concentração de 1 milicuries por mililitro em solução salina estéril a 0,9%. Em seguida, injete 200 microlitros da solução 89Zr-DFO-J591 na veia lateral da cauda dos camundongos portadores de xenoenxerto.
No momento de imagem desejado, anestesiar o camundongo com uma mistura de isoflurano e oxigênio a 2%. Coloque o mouse em uma cama de scanner PET de pequeno porte. Verifique a anestesia usando o método de pinça do dedo do pé e aplique pomada veterinária nos olhos do camundongo para evitar o ressecamento durante a anestesia.
Mantenha a anestesia durante o exame usando uma mistura de isoflurano e oxigênio a 1%. Em seguida, adquira os dados PET para o mouse por meio de varredura estática com um mínimo de 40 milhões de eventos coincidentes usando uma janela de energia de 350 a 700 quiloelétron-volts e uma janela de tempo de coincidência de seis nanossegundos.