Uma técnica in vivo para rastrear o tráfego de células T induzido por anticorpos biespecíficos para tumores

Pegue um camundongo anestesiado e imunocomprometido com um xenoenxerto de tumor subcutâneo que superexpressa um antígeno associado ao tumor ou TAA.

Injete retroorbitalmente células T efetoras que expressam a enzima luciferase.

Administre subcutaneamente a interleucina 2, uma citocina que suporta a sobrevivência das células T efetoras.

Injete retroorbitalmente anticorpos biespecíficos projetados para conter locais de ligação para células T e tumorais. Permita que o mouse se recupere.

Os anticorpos e as células T chegam ao tumor através da circulação.

Os anticorpos se ligam ao CD3 nas células T e ao TAA nas células tumorais, induzindo as células T efetoras a liberar toxinas que iniciam a apoptose nas células tumorais e liberam quimiocinas que recrutam mais células T para o tumor.

Anestesiar o camundongo, injetar retroorbitalmente um substrato de luciferase e proceder à imagem in vivo.

A luciferase dentro das células T oxida o substrato, emitindo bioluminescência.

Observe a bioluminescência ao longo do tempo. A magnitude do sinal se correlaciona com a extensão da infiltração de células T dentro do tumor.

Depois de anestesiar o camundongo com uma agulha de calibre 26, injete 20 milhões