Produção de anticorpos a partir de uma cultura de crescimento excessivo em lote de células de mamíferos transfectadas
Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 2:29 min. • July 8th, 2025
Comece com um frasco contendo células de mamíferos transfectadas de forma estável em um meio sem soro suplementado com um surfactante não iônico para evitar a agregação celular.
Essas células carregam um genoma modificado contendo genes integrados de cadeia pesada e leve para a produção de anticorpos terapêuticos.
Introduzir a triptona, uma fonte rica em nutrientes de peptídeos e aminoácidos essenciais para o metabolismo celular.
A célula utiliza esses aminoácidos e peptídeos e se multiplica, resultando em um crescimento excessivo que suporta um maior rendimento de anticorpos.
A expressão de genes nas células impulsiona a produção de polipeptídeos de cadeia pesada e leve.
No retículo endoplasmático, essas cadeias se dobram e dimerizam por meio de ligações dissulfeto entre cadeias, formando anticorpos terapêuticos.
No aparelho de Golgi, os anticorpos sofrem modificações pós-traducionais. Eles são então embalados em vesículas e liberados no meio.
Incube as células por mais tempo para aumentar a produção de anticorpos.
À medida que a viabilidade celular começa a diminuir, colha o sobrenadante.
Filtre o sobrenadante contendo anticorpos terapêuticos e armazene-o a uma temperatura mais b
Veja a transcrição completa e aceda a milhares de vídeos científicos