Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 3:38 min. • July 8th, 2025
Pegue uma lâmina com poços de reação contendo seções finas de diferentes tecidos vegetais. Os tecidos são fixados e embutidos dentro de uma resina para imunocoloração.
Coloque a lâmina dentro de uma câmara de incubação escura e úmida para evitar a exposição à luz e a evaporação do reagente durante as etapas subsequentes.
Introduzir uma solução de bloqueio para evitar a interação inespecífica de anticorpos.
Lave para remover o excesso de solução de bloqueio e, em seguida, adicione anticorpos primários específicos do antígeno e incuba.
Os anticorpos se ligam aos seus antígenos-alvo, ou seja, proteínas arabinogalactana e pectinas na parede celular.
Introduza anticorpos secundários conjugados com fluoróforo, que se ligam aos anticorpos primários.
Lave para remover os anticorpos não ligados e aplique um corante fluorescente que se liga à celulose, marcando a parede celular.
Adicione um meio de montagem e sele com uma lamínula.
Sob um microscópio, a fluorescência do corante e os anticorpos ligados ajudam a visualizar a celulose nas paredes celulares das plantas colocalizadas com proteínas arabinogalactana ou pectina, exibindo sua distribuição específica do tecido.
Para preparar uma câmar
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