Um ensaio para estudar o impacto do tratamento fotodinâmico com um fotossensibilizador na atividade metabólica dos macrófagos

Pegue uma placa de vários poços contendo macrófagos aderentes.

Adicione fotossensibilizador de teste diluído em série aos poços de teste. O poço de controle não possui o fotossensibilizador.

Incubar para captação celular do fotossensibilizador.

Exponha a placa à luz UV, denominada tratamento fotodinâmico, ou PDT, por um período especificado.

Nos poços de teste, os fotossensibilizadores dentro dos macrófagos absorvem a luz ultravioleta e ficam excitados.

Esses fotossensibilizadores excitados reagem com o oxigênio molecular, formando espécies reativas de oxigênio, ou ROS, e causando toxicidade celular.

Para neutralizar isso, as enzimas antioxidantes celulares, incluindo superóxido dismutase e catalase, neutralizam as ROS, prevenindo o dano oxidativo celular.

Adicione o reagente XTT, um sal de tetrazólio e um reagente de acoplamento de elétrons aos poços de teste e controle. Incubar.

Em células metabolicamente ativas, o sistema de transporte de elétrons da membrana transplasmática transfere elétrons do NADH mitocondrial para o reagente de acoplamento de elétrons, reduzindo o XTT a um produto de formazan laranja.

A absorbância comparável de formazan em poços de teste e controle indica