Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 5:43 min. • January 15th, 2026
Pegue uma extração STop And Go ou STAGE Tip, uma coluna de purificação miniaturizada.
A ponta contém pequenas esferas de sílica ligadas a longas cadeias de hidrocarbonetos para purificação de peptídeos baseada em interação hidrofóbica.
Lavar com tampões contendo uma elevada percentagem de acetonitrila, removendo as impurezas da resina.
Introduza um tampão de ligação e uma centrífuga, equilibrando a coluna para uma ligação ideal de peptídeos.
Carregar uma amostra de peptídeo pré-digerida obtida a partir de células diferenciadas semelhantes a neutrófilos, contendo fragmentos de peptídeos e impurezas, incluindo sais.
Centrifugue para passar a amostra pela coluna. Os fragmentos de peptídeos se ligam às cadeias de hidrocarbonetos por meio de interações hidrofóbicas, enquanto os sais são removidos.
Adicione o tampão de ligação e centrifugue, removendo as impurezas restantes.
Introduza o tampão contendo alta acetonitrila para eluição.
Usando uma seringa, passe o tampão pela coluna. A acetonitrila se liga às cadeias de hidrocarbonetos, deslocando os fragmentos de peptídeos que eluem com o tampão.
Realize perfis proteômicos para identificar os peptídeos purificados.
Para começar, embale trê
Veja a transcrição completa e aceda a milhares de vídeos científicos