Fotoimunoterapia de infravermelho próximo para eliminação celular direcionada em culturas 3D mistas

Pegue uma cultura de esferóides mistos de gota pendurada, que são agregados celulares heterogêneos que consistem em células-alvo que expressam receptores de fator de crescimento e uma proteína fluorescente, enquanto as células não-alvo expressam uma proteína fluorescente de cor diferente.

Substituir o meio por um conjugado anticorpo-fotoabsorvedor composto por um anticorpo monoclonal específico da célula-alvo e um corante fotoabsorvedor.

Incubar para facilitar a ligação do anticorpo aos receptores das células-alvo.

Lave os esferóides com meios para remover os conjugados não ligados e, em seguida, transfira-os para um prato com fundo de vidro com meios para irradiação de luz.

Exponha os esferoides à luz infravermelha próxima para fotoimunoterapia, desencadeando uma reação fotoquímica do corante fotoabsorvedor nas células-alvo, causando danos rápidos à membrana celular e morte celular.

Este processo elimina as células-alvo sem danificar as células não-alvo.

Transfira os esferóides para uma nova placa suspensa. Adicione mídia e incube para o crescimento esferóide.

Sob um microscópio de fluorescência, a ausência de fluorescência da célula-alvo indica eliminação efetiva de células, enqu