Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 5:23 min. • July 8th, 2025
Comece com células do sangue do cordão umbilical humano, incluindo células-tronco hematopoiéticas CD34+, ou HSCs.
Adicione anticorpos para bloquear os receptores Fc celulares, impedindo a ligação não específica de esferas magnéticas específicas para HSC.
Introduzir as esferas magnéticas revestidas com anticorpos dirigidas às HSC CD34+. Centrifugar e rejeitar o sobrenadante.
Ressuspenda as células em um buffer. Passe-os por um separador magnético para reter HSCs ligados a contas; células não ligadas fluem.
Remova o campo magnético para coletar os HSCs.
Centrifugue e ressuspenda as células em um meio de crescimento. Coloque as células em placas e incuba.
O meio contém fatores de crescimento e citocinas que promovem a sobrevivência e expansão do HSC.
Colha as células. Adicione um meio de congelamento, transfira para um criogênico e congele.
Para gerar um sistema imunológico humano, ou HIS, modelo de camundongo, descongele os HSCs. Adicione-os a um meio pré-aquecido.
Centrifugue e ressuspenda as células em um tampão.
As células estão prontas para injeção em um filhote de camundongo imunodeficiente para a geração do modelo HIS.
Para começar, ressuspenda o pellet de células CD34-positiva
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