Um método para o tratamento com alto teor de sal de células dendríticas e sua transferência adotiva para camundongos

Comece com uma placa de vários poços contendo uma suspensão de células dendríticas ou DCs.

Para imitar uma condição hipertensiva, adicione um meio de cultura contendo uma alta concentração de íons de sódio e incuba.

Durante a incubação, os íons de sódio entram na célula, aumentando a concentração intracelular de sódio.

Isso desencadeia a troca de íons de sódio intracelulares por íons de cálcio extracelulares.

O aumento dos níveis internos de cálcio ativa vias que facilitam a geração de aldeídos reativos, que se ligam às proteínas celulares. Isso ativa as DCs, que exibem essas proteínas modificadas em sua superfície.

Pós-incubação, recolher as células num tubo e centrifugar.

Remova o sobrenadante. Adicione um novo buffer para ressuspender as células.

Puxe a suspensão celular para uma seringa.

Pegue um camundongo anestesiado e injete a suspensão celular retroorbitalmente, que é uma área atrás da órbita ocular.

Esse processo de injeção de células imunes ativadas é chamado de transferência de células adotivas.

Pipete 900 microlitros da suspensão DC em uma placa de falcão de fundo plano de 24 poços. Adicione 100 microlitros do meio de cultura DC com alto teor de sal a cada poço para obt