Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 4:16 min. • July 8th, 2025
Comece com um camundongo imunodeficiente NOD contido que não possui células imunológicas e é propenso a diabetes.
Este camundongo é pré-injetado com células beta pancreáticas transgênicas que produzem insulina e expressam enzimas luciferase.
Pegue uma seringa contendo esplenócitos pré-tratados derivados de um camundongo diabético. Os esplenócitos incluem células T autorreativas com a capacidade de reconhecer os peptídeos de insulina.
Administre esses esplenócitos na veia da cauda do camundongo.
Os esplenócitos circulam e atingem o pâncreas, onde as células T autorreativas reconhecem os peptídeos de insulina nas células beta e são ativadas.
Essas células ativadas liberam moléculas citotóxicas, iniciando a destruição das células beta por meio da autorreatividade.
Em seguida, injete um substrato de luciferase no peritônio do camundongo. O substrato se difunde nessa região e entra nas células beta.
Dentro das células, o substrato interage com as enzimas luciferase, produzindo luminescência.
Usando um sistema de imagem bioluminescente, capture imagens em intervalos regulares
Uma diminuição gradual na luminescência indica a destruição de células beta transgênicas devido à auto-reatividad
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