Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Imunologia
0 visualizações • 6:08 min. • July 8th, 2025
Células-tronco pluripotentes induzidas por cultura em uma camada alimentadora de células estromais em uma matriz de gelatina.
A camada alimentadora imita o ambiente extracelular natural, guiando a diferenciação de células-tronco em organoides em forma de cúpula contendo células progenitoras hematopoiéticas.
Adicione enzimas para dissociar as células co-cultivadas.
Transfira as células para um prato fresco revestido de gelatina para adesão das células estromais.
Coletar as células progenitoras hematopoiéticas não aderidas em um meio de diferenciação.
Cultive-os em uma camada alimentadora fresca para promover a diferenciação de células progenitoras em células T duplamente positivas com receptores CD4 e CD8 e células T duplamente negativas sem ambos os receptores.
Transfira as células para um tubo. Incube-os com esferas magnéticas carregando anticorpos específicos para CD4 que marcam seletivamente as células T duplamente positivas.
Use um separador magnético para isolar as células duplamente positivas e cultive-as em uma nova camada de alimentação.
Suplemento com uma mistura de citocinas e anticorpos para estimular as células, induzindo a regulação negativa do receptor CD4 e promovend
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