Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 4:51 min. • July 8th, 2025
Corte o córtex de um camundongo em pedaços pequenos e transfira para um meio de dissecação a frio contendo uma solução salina tamponada.
Adicione enzimas digestivas para dissociar a matriz extracelular.
Para remover enzimas residuais, lave com o meio de dissecção a frio.
Substitua este meio por um meio de enriquecimento de astrócitos.
Em seguida, use uma pipeta para dissociar os pedaços de tecido.
Passe a suspensão por um filtro para remover o tecido não dissociado e obter células únicas.
Transfira as células para uma placa revestida de polímero carregada positivamente. Incubar com agitação.
Os astrócitos aderem firmemente, enquanto os neurônios, micróglia e oligodendrócitos fracamente ligados se desprendem.
O meio de enriquecimento converte astrócitos maduros em astrócitos poligonais em divisão.
Remova as células destacadas e lave os astrócitos com um tampão fosfato.
Adicione enzimas digestivas para separar os astrócitos.
Adicione um meio contendo soro para interromper a atividade enzimática. Colete os astrócitos em um tubo e centrifugue.
Descarte o sobrenadante. Ressuspenda as células em um meio de maturação de astrócitos para promover uma estrutura típica de astrócitos maduros e
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