Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 4:33 min. • July 8th, 2025
Tome células-tronco pluripotentes induzidas por humanos transduzidas ou hiPSCs, superexpressando neurogenina-2, impulsionadas pelo sistema induzível por doxiciclina antibiótica.
Transfira-os para as áreas de eletrodos ativos revestidos com proteínas de adesão nos poços de uma matriz de microeletrodos de vários poços.
Permita que os hiPSCs se fixem nas áreas dos eletrodos ativos revestidos.
Adicione meios suplementados com doxiciclina, que induz a superexpressão da neurogenina-2, um fator de transcrição específico para neurais.
A neurogenina-2 desencadeia vias moleculares e leva à diferenciação de hiPSC em células precursoras neurais, enquanto os constituintes do meio auxiliam na sobrevivência celular.
Introduza astrócitos nos poços de matriz de microeletrodos, onde eles aderem à área ativa do eletrodo.
Substitua o meio por meio neurobasal contendo fatores de crescimento neurogênicos, doxiciclina e um inibidor de crescimento celular.
O inibidor previne a proliferação de astrócitos e elimina hiPSCs indiferenciados.
Com o tempo, a expressão sustentada da neurogenina-2 e os fatores de crescimento impulsionam a diferenciação das células precursoras neurais em neurônios.
Além disso, subs
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