Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 3:00 min. • July 8th, 2025
Comece com uma câmara microfluídica revestida de polímero com poços proximais e distais conectados por meio de vários microsulcos.
No poço proximal, coloque tecidos embrionários da medula espinhal de camundongos ricos em neurônios motores em desenvolvimento.
Complemente bem com um meio nutriente. Incubar para permitir o crescimento dos neurônios e a aderência à superfície revestida de polímero.
Mais tarde, adicione um meio nutriente livre de fator de crescimento ao poço proximal.
Em poços distais, adicione um volume maior de meio nutriente contendo fatores de crescimento para criar diferenças de concentração e volume.
Essas diferenças fazem com que os axônios, as projeções neuronais mais longas, cresçam em direção aos poços distais através dos microsulcos.
Adicione uma solução de corante fluorescente em ambos os poços.
As moléculas de corante entram nos neurônios e mancham as mitocôndrias e organelas ácidas em ambas as extremidades.
Na imagem confocal ao vivo, as organelas coradas com fluorescência se movem em ambas as direções entre os corpos celulares neurais e os axônios, confirmando o transporte axonal nos neurônios motores.
Descarte todo o meio do compartimento proximal do MFC
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