Geração de Células Neuronais a Partir de Células-Tronco Pluripotentes Derivadas do Sangue

Pegue uma microplaca com lamínulas de vidro colocadas no fundo dos poços.

Introduza um polímero carregado positivamente para revestir as lamínulas e lave para remover qualquer polímero não ligado. Trate com uma proteína da matriz extracelular para revestir as lamínulas e aspirar as proteínas não ligadas.

O revestimento atua como um substrato de cultura que facilita a adesão celular.

Adicione um meio de indução aos poços e introduza uma suspensão de células-tronco pluripotentes derivadas do sangue, ou BD-PSCs. Essas células, capazes de se diferenciar em vários tipos de células, são geradas por meio da reprogramação de células progenitoras do sangue.

Incubar para que as células adiram ao substrato. Fatores de crescimento e nutrientes no meio de indução transformam BD-PSCs em células progenitoras neurais.

Introduzir um meio de diferenciação contendo fatores de crescimento neuronal e incubar, desencadeando a diferenciação dos progenitores neurais em um fenótipo neuronal, exibindo processos celulares estendidos e contatos célula-célula.

Coloque as lamínulas de vidro em placas de 4 poços e cubra-as com 1 a 5 poli-L-ornitina diluída em água bidestilada Depois de incubar as lamínulas a 37