Uma técnica para a incubação prolongada do tecido neuronal da retina

Pegue um olho de rato intacto no líquido cefalorraquidiano artificial, ou aCSF, e faça uma incisão para isolar a ocular que contém a retina.

Trate com uma solução enzimática para remover a membrana limitante interna, expondo as células neuronais.

Mergulhe o tecido em uma solução de inibição para interromper a digestão e lave para remover o excesso de solução.

Coloque o tecido em uma incubadora especializada a baixa temperatura para retardar o metabolismo celular, preservando o tecido.

Esta incubadora compreende uma câmara principal com uma malha para montagem de tecidos. A câmara é preenchida com aCSF e sua temperatura e pH são controlados para preservar a funcionalidade do tecido.

Para eliminar a contaminação microbiana, o aCSF é bombeado para outra câmara e tratado com radiação ultravioleta para matar quaisquer micróbios.

O aCSF esterilizado é então bombeado de volta para a câmara principal.

Para isolar a retina, remova a ocular, separe a retina do tecido circundante e devolva-a à incubadora.

Para a preparação de toda a montagem da retina, enuclee imediatamente os olhos de um animal sacrificado. Faça um pequeno corte ao longo da ora serrata e coloque os olhos em Ames Media ou aCS