Isolamento e Cultura de Células-Tronco Neurais Adultas da Zona Subcalosa de Camundongos
Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 5:31 min. • July 8th, 2025
Comece com um cérebro de camundongo em uma matriz cerebral gelada.
Obtenha seções contendo a zona subcalosa ou SCZ. Transfira a seção para um tampão de fosfato frio.
Sob um microscópio de dissecação, corte a parte SCZ.
Pique a SCZ dissecada em pedaços menores.
Transfira esses pedaços para um tampão de digestão. Incubar para dissociar as células do tecido.
Centrifugue e descarte o sobrenadante. Ressuspenda as células em um meio adequado.
Transfira as células para uma placa de cultura e adicione fatores de crescimento específicos.
As células-tronco neurais adultas se dividem, formando aglomerados chamados neuroesferas.
A distribuição inadequada de nutrientes em aglomerados de células limita o crescimento celular.
Para dispersar os cachos, centrifugue e descarte o sobrenadante. Ressuspenda os cachos em um tampão de dissociação e incuba.
Pipete a solução para cima e para baixo para gerar células individuais.
Centrifugue e descarte o sobrenadante.
Ressuspenda as células e transfira-as para um meio adequado para obter uma monocamada.
Depois de dissecado, transfira o cérebro do camundongo para o tampão PBS frio e enxágue-o duas vezes para remover o excesso de sangue. Em seguida, coloque o
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