Co-cultivo do hipocampo ventral e do núcleo accumbens

Comece com uma seção coronal do cérebro de camundongo pós-natal contendo uma região ventral do hipocampo, uma área dentro da região inferior do cérebro.

Corte o tecido ventral do hipocampo e transfira-o para um meio adequado.

Corte o tecido em pedaços menores e deixe-os se prender a uma lamínula revestida com matriz em uma placa multipoços.

Os neurônios do tecido começam a estender as projeções.

Em seguida, pegue um núcleo accumbens derivado de embrião de camundongo, um pequeno tecido profundo dentro do prosencéfalo.

Corte o tecido do núcleo accumbens em pedaços pequenos. Transfira-os para um tubo.

Adicione enzimas de digestão para dissociar as proteínas da matriz extracelular. Lave para reduzir os níveis de enzimas.

Pipete os pedaços de tecido para cima e para baixo para gerar células únicas.

Centrifugue as células. Remova o sobrenadante e ressuspenda as células.

Adicione esta suspensão à lamínula com os tecidos do hipocampo ventral e incube.

As terminações nervosas do pedaço de tecido ventral do hipocampo se conectam com as células neuronais do núcleo accumbens, formando uma junção de comunicação chamada sinapse.

Antes da coleta de tecido, pré-incube lamínulas de vidro revestido