Estabelecendo uma co-cultura de células da polpa dentária e neurônios do trigêmeo para comunicação cruzada

Comece com uma suspensão mesenquimal rica em células-tronco obtida do tecido da polpa dentária de camundongos.

Incubar para permitir a adesão e proliferação celular, formando uma monocamada.

Coloque uma inserção de membrana porosa revestida com laminina no poço que contém as células da polpa dentária.

Semeie a inserção com um meio de co-cultura contendo neurônios trigêmeos derivados do cérebro do camundongo. Incubar para permitir a fixação dos neurônios.

Substitua o meio por um meio de co-cultura contendo reguladores de crescimento, como uridina e 5-fluoro-2 desoxiuridina.

Essas moléculas entram nas células e controlam o crescimento de células-tronco mesenquimais em proliferação ativa, inibindo a síntese de DNA.

Com o tempo, as células mesenquimais secretam pequenas moléculas de sinalização que passam pela membrana porosa para estimular os neurônios do trigêmeo.

Essa estimulação faz com que os processos neuronais dos neurônios do trigêmeo se alonguem em direção às células mesenquimais. Além disso, os neurônios secretam moléculas de sinalização, permitindo a comunicação cruzada.

Após a eutanásia do mouse, coloque a cabeça em uma almofada descartável de modo que a boca fique voltada