Estabelecendo um tumor cerebral em um modelo de co-cultura de fatia organotípica

Comece com uma fatia de cérebro de camundongo embebida em agarose.

Coloque a fatia de cérebro em uma inserção de membrana contendo um meio de cultura.

Mergulhe a fatia para garantir uma exposição uniforme aos nutrientes.

Colete um pequeno volume do meio do inserto e transfira-o para o fundo do poço.

Remova o excesso de meio da inserção.

Transferir a inserção para uma placa de Petri que contenha o meio de cultura.

Remova cuidadosamente as bordas de agarose da fatia para torná-la acessível para interações subsequentes.

Coloque o inserto em um novo poço contendo o meio de cultura e incube-o para facilitar a recuperação das fatias.

Adicione células tumorais cerebrais humanas à fatia e incuba.

As células tumorais interagem com as células cerebrais e o microambiente dentro da fatia, iniciando a multiplicação e estabelecendo um modelo de co-cultura 3D.

Usando uma escumadeira, coloque uma fatia de cérebro na mídia no inserto e pressione suavemente a fatia para que fique totalmente submersa. Repita o procedimento para todas as fatias. Em seguida, retire um mililitro de meio de cultura fatiado da parte superior da inserção e distribua-o no fundo do poço.

Remova e descarte o excesso de meio a