Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 5:42 min. • July 8th, 2025
Pegue uma microplaca com uma cultura aderente de células gliais derivadas de um cérebro de rato. A cultura contém astrócitos, microglia e oligodendrócitos.
Remova o meio, incube com uma solução enzimática para separar as células e depois transfira-as para um tubo.
Centrifugue e remova o sobrenadante com detritos celulares. Ressuspenda as células em um meio quente.
Triturar usando uma seringa para quebrar os aglomerados de células e filtrar usando um filtro para obter uma suspensão unicelular.
Adicione um biopolímero fotoreticulável, agentes de reticulação e componentes da matriz extracelular.
Despeje a mistura em um molde preso a uma lamínula. Exponha a mistura à luz de alta intensidade para induzir a reticulação, formando um gel e encapsulando as células gliais.
Retire o molde e coloque as lamínulas em uma microplaca. Adicione um meio quente e incube o gel em condições fisiológicas.
As células proliferam dentro da matriz extracelular de suporte e criam uma rede celular, estabelecendo uma cultura tridimensional de células gliais.
24 horas antes do encapsulamento celular, aspire o meio de culturas primárias de duas semanas e adicione 1 mililitro de meio fresco a cada poço. No dia do
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