Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 3:07 min. • July 8th, 2025
Comece com uma placa revestida com ECM e grupos de sementes de células-tronco pluripotentes humanas em um meio de crescimento contendo inibidores de Rho-quinase.
A ECM aumenta a ligação celular, enquanto os inibidores bloqueiam as Rho-quinases, impedindo a morte celular apoptótica e promovendo a sobrevivência e proliferação celular.
Introduzir um meio de diferenciação neural para induzir a diferenciação de células-tronco em células progenitoras neurais.
Trate com uma solução de descolamento; as enzimas nesta solução degradam a ECM e o contato celular, liberando as células.
Transfira-os para um balão não revestido contendo inibidores da Rho-quinase.
Os inibidores facilitam a sobrevivência celular e a agregação espontânea em estruturas tridimensionais ou esferoides.
Suplemente os esferoides com um meio de diferenciação neural rico em fatores de crescimento, permitindo que as células progenitoras neurais se diferenciem em progenitores de astrócitos e formem astrosferas.
Regularmente, adicione uma solução de desprendimento para dissociar as astrosferas em aglomerados menores. Isso permite que os nutrientes cheguem às células internas do esferóide e mantenham sua viabilidade.
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