Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 3:58 min. • July 8th, 2025
Comece com uma cultura aderente de células estromais da medula óssea.
Sujeitar as células à hipóxia, uma condição caracterizada por níveis reduzidos de oxigênio, por um período necessário.
Isole as células pré-condicionadas por hipóxia, centrifugue e remova o sobrenadante. Ressuspenda as células em meios progenitores neuronais contendo fatores de crescimento neuronal.
Transfira as células para uma placa de cultura de baixa fixação e incuba.
O pré-condicionamento da hipóxia e os fatores de crescimento neuronal induzem a diferenciação de células estromais em progenitores neuronais.
A superfície da placa de baixa fixação mantém os progenitores em suspensão, facilitando sua proliferação e agregação em neuroesferas tridimensionais.
Colha as neuroesferas, centrifugue e remova o sobrenadante. Ressuspenda as células em meios de indução glial contendo fatores de crescimento específicos da glia.
Transfira as neuroesferas para uma placa de cultura revestida com laminina, um componente da matriz extracelular, e poli-D-lisina, um polímero sintético carregado positivamente.
A superfície revestida promove a adesão celular, facilitando a fixação da neuroesfera.
Os fatores de crescimento específico
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