Desenvolvimento de organoides nervosos motores derivados de iPSC humanos usando um chip microfluídico

Tome células-tronco pluripotentes induzidas por humanos, ou iPSCs, em um meio de células-tronco rico em nutrientes com inibidores de Rho-quinase.

Os inibidores entram nas células e bloqueiam as enzimas Rho-quinase, impedindo a morte celular por apoptose.

As células utilizam os nutrientes para proliferar e se agregar espontaneamente para formar um aglomerado de células tridimensional chamado esferóide.

Gradualmente, substitua o meio por um meio de indução neural. Os moduladores de sinalização do meio impulsionam a diferenciação de células-tronco em células neurais.

Substitua por um meio neural rico em fatores de crescimento para diferenciar as células esferóides em neurônios motores e formar um esferóide do neurônio motor ou MNS.

Transfira esses MNS para um chip microfluídico revestido de polímero contendo um meio de maturação.

Os fatores de crescimento nervoso no meio estimulam os axônios ou projeções mais longas de neurônios a crescer a partir do esferóide e se estender através do microcanal do chip.

Isso forma um organoide do nervo motor, um modelo tridimensional do tecido nervoso motor.

Para induzir a diferenciação de células 3D iPS em neurônios motores, semeie 4 x 10⁴ células i