Diferenciação de uma linha celular de neuroblastoma humano em neurônios maduros
Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 5:08 min. • July 8th, 2025
Comece com uma linha celular de neuroblastoma indiferenciada composta por células semelhantes a neurônios e epiteliais em um meio de alta concentração sérica.
Remover o meio e adicionar um meio de diferenciação contendo uma concentração sérica reduzida, suplementado com ácido retinóico.
A privação sérica impede a proliferação de células epiteliais.
O ácido retinóico induz a expressão gênica neuronal nas células semelhantes a neurônios, transformando-as em um fenótipo mais diferenciado.
Adicione um coquetel de tripsina-EDTA para separar as células parcialmente diferenciadas.
Adicione meios contendo proteínas séricas para bloquear a tripsina.
Plaquear as células e introduzir um novo meio de diferenciação contendo ácido retinóico e um nível sérico ainda mais reduzido.
As células continuam a desenvolver processos prolongados.
Adicione tripsina para separar as células.
Em seguida, adicione mídia para bloquear a tripsina e coloque as células em um prato revestido de proteína de matriz extracelular para promover a adesão celular.
Finalmente, suplemente com meio sem soro contendo fatores de crescimento neuronal.
Esses fatores induzem a diferenciação terminal em neurônios maduros exibindo e
Veja a transcrição completa e aceda a milhares de vídeos científicos