Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 2:22 min. • July 8th, 2025
Pegue células-tronco embrionárias de camundongos, ou mESCs, suspensas em um meio de diferenciação e incuba.
Na cultura em suspensão, as mESCs se agregam para formar uma estrutura denominada corpos embrióides ou EBs.
EBs são agregados tridimensionais que imitam um embrião em desenvolvimento e podem ser diferenciados em células neurais.
Transfira os EBs para um tubo e deixe-os assentar por gravidade.
Remova o meio empobrecido em nutrientes; ressuspenda os EBs em um meio fresco e transfira-os para uma placa de cultura.
Incubar a cultura de suspensão para facilitar o crescimento de EBs.
Transfira os EBs suspensos no meio para uma placa multipoços. Os poços são revestidos com uma proteína de adesão, permitindo que os EBs se fixem.
Introduzir ácido retinóico, que entra nas células e desencadeia a formação de um complexo de transcrição.
O complexo induz a expressão gênica, promovendo a diferenciação das células em células progenitoras neurais, ou NPCs, que exibem processos celulares estendidos.
Adicione 1,5 milhão de células-tronco embrionárias de camundongos em uma placa bacteriana não adesiva em 10 mililitros de meio de diferenciação basal e incube a placa a 37 graus Celsius e 5% de dió
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