Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 4:01 min. • July 8th, 2025
Tome os gânglios sensoriais pré-lavados em um tubo.
Adicione uma solução de dissociação contendo uma mistura de enzimas digestivas e incube.
Essas enzimas quebram a matriz extracelular, liberando células individuais.
Após a incubação, remova a solução de dissociação.
Lave os gânglios com um tampão fosfato e adicione uma nova solução de dissociação.
Pipete os gânglios para cima e para baixo para dissociar as células.
Passe a suspensão por um filtro de células para remover quaisquer grumos.
Colete todas as células restantes do fundo do filtro e coloque-as no tubo.
Coloque a suspensão da célula sobre um tubo de gradiente de densidade e centrifugue.
Com base nas diferenças de forma e massa, as células migram para a camada inferior, enquanto os detritos celulares permanecem na camada superior.
Descarte a camada superior.
Adicione meio fresco à suspensão celular restante e centrifugue.
Rejeitar o sobrenadante e guardar as células dos gânglios sensoriais para utilização posterior.
Após a colheita dos gânglios sensoriais, aspire 500 microlitros de solução de dissociação dos gânglios de cada tubo sem perturbar os gânglios. Em seguida, adicione 1 mililitro de PBS a cada amostra e espere que
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