Um método de tubo de rolo modificado para a cultura de longo prazo de fatias de cérebro de roedores

Pegue fatias de cérebro obtidas de um cérebro de roedor. As fatias consistem no hipocampo, que contém neurônios do hipocampo.

Transfira as fatias de cérebro para lamínulas contendo plasma de galinha.

Aplique plasma misturado com trombina nas fatias. A trombina induz a coagulação plasmática, criando um andaime biológico que promove a adesão dos cortes às lamínulas.

Pegue tubos de rolos de lados planos com um orifício no lado plano e um disco adesivo preso ao redor do orifício na parte externa dos tubos.

Posicione as lamínulas nos discos adesivos, garantindo que as fatias de cérebro fiquem voltadas para o interior dos tubos.

Adicione um meio de cultura neuronal aos tubos e flua em uma mistura de dióxido de carbono e ar.

Tampe os tubos, insira-os em um rack de rolos e incuba-os com um movimento de rolamento.

A aeração fornecida pela incubação rolante e os nutrientes do meio suportam a cultura a longo prazo das fatias de cérebro.

Para começar, prepare o suporte para tubos de rolos e faça um gabarito para ajudar a fazer um furo nos tubos de rolos, conforme descrito no protocolo de texto que acompanha. Usando o gabarito, segure na posição um tubo de cultura de plástico de 1 centímetro de