Geração e manutenção de culturas de fatias de tecido de glioblastoma humano

Pegue o tecido de glioblastoma humano, um tumor cerebral primário originado de células gliais.

Lave o lenço usando um meio de processamento gelado para remover o sangue residual.

Corte o tecido em pedaços e insira-o em um molde de incorporação contendo agarose derretida.

Resfrie o molde, permitindo que a agarose polimerize e forme uma matriz de gel estável.

Remova o bloco de tecido do molde e fixe-o na placa de amostra de um vibratome.

Adicione o meio de processamento gelado para submergir o bloco. Passe uma mistura de gases oxigenados para arejar o meio, mantendo a viabilidade do tecido.

Corte o tecido tumoral embutido em fatias finas.

Transfira uma fatia para uma placa de Petri contendo o meio de processamento gelado para preservar a arquitetura do tecido.

Em seguida, coloque a fatia de tecido em uma inserção de membrana permeável em um poço contendo um meio de manutenção de cultura de fatias.

Mantenha a fatia em condições fisiológicas. A cultura de fatias está pronta para ensaios a jusante.

Comece usando uma pinça estéril para colocar inserções vazias de cultura de PTFE em cada poço de uma placa de seis poços contendo 1 mililitro de meio de manutenção de cultura de fatias por po