Desenvolvendo um modelo de cultura de células triplas da barreira hematoencefálica humana

Comece adicionando pericitos na parte inferior da inserção do poço.

Cubra o recipiente com uma placa de cultura e incuba.

Os pericitos se ligam à membrana do poço, formando uma camada unicelular ou uma monocamada.

Pegue outro prato de cultura.

Adicione astrócitos humanos ao poço em um meio adequado. Em seguida, incube a placa.

Os astrócitos se fixam no fundo do poço e formam uma monocamada.

Descarte o meio e adicione astrócitos e pericitos frescos.

Agora, pegue a placa de cultura contendo o poço com a camada de pericito.

Inverter a placa e transferir o compartimento para o poço que contém a camada de astrócitos.

Adicione as células endoteliais do cérebro humano ao lado superior do poço e incuba.

As células endoteliais se ligam à inserção do poço, formando um sistema de cultura de células triplas que se assemelha à barreira hematoencefálica, uma interface crucial que separa a corrente sanguínea e o cérebro.

Comece cultivando HBVP em frascos de cultura T75 com uma superfície ativada para adesão celular dentro de uma incubadora de dióxido de carbono a 5% a 37 graus Celsius até ficar confluente. Uma vez alcançada a confluência, aspire o meio parasita antigo e lave as células com 5 mili