Um método para bioimpressão 3D de astrócitos corticais murinos

Pegue uma suspensão de astrócitos.

Adicione uma solução de bioink contendo gelatina, derivados de gelatina fotoreticuláveis, fotoiniciadores, fibrinogênio e laminina.

Transfira a suspensão para uma seringa com uma agulha romba.

Resfrie a seringa para gelificação de bioink. Conecte a seringa ao cabeçote de impressão da bioimpressora.

Posicione a agulha adequadamente na placa de cultura. Inicie a bioimpressão com os parâmetros definidos e o design.

A biotinta contendo astrócitos é empurrada para fora da agulha e é depositada em camadas na placa, formando uma estrutura tridimensional com astrócitos presos.

Exponha a construção bioimpressa à luz ultravioleta. O fotoiniciador auxilia na reticulação de derivados da gelatina, aumentando a estabilidade da bioconstrução.

Trate com trombina e íons de cálcio.

A trombina, com íons de cálcio, converte o fibrinogênio em fibrina, formando-se em uma rede de biopolímeros 3D estável.

Descarte a solução e lave com tampão para remover os agentes de reticulação.

Adicione meios de astrócitos e incuba. A laminina auxilia na adesão e disseminação dos astrócitos, formando um tecido neural 3D rico em astrócitos.

Para obter uma concentração final de 1 x 10⁶