Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 4:02 min. • July 8th, 2025
Comece com gliomaspheres, agregados celulares derivados de um tumor cerebral ou glioblastoma.
Adicione enzimas de dissociação. Incubar para separar as células do glioblastoma e obter uma suspensão unicelular.
Em seguida, introduza um meio de cultura enriquecido com soro para interromper a atividade enzimática.
Centrifugue e remova o sobrenadante e, em seguida, ressuspenda as células.
Filtrar a suspensão, centrifugar e retirar o sobrenadante.
Ressuspenda as células em precursores de hidrogel que contêm pequenos peptídeos.
Carregue esta mistura em poços com um molde de silicone pré-montado contendo ácido hialurônico.
Misture a solução. Incubar para permitir a interação entre o ácido hialurônico e os precursores do hidrogel, formando um hidrogel que facilita o aprisionamento celular.
Cubra o hidrogel com meios de cultura para sustentar a sobrevivência celular.
Depois de desmontar o molde, incube o hidrogel.
Dentro do hidrogel, as proteínas de adesão nas células interagem com os peptídeos precursores e o ácido hialurônico.
Isso faz com que as células formem pequenos aglomerados e desenvolvam uma cultura tridimensional.
Para começar, coloque moldes de borracha de silicone limpos e secos
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