Gerando uma cultura organoide a partir de uma suspensão de células tumorais cerebrais

Comece com um tubo de microcentrífuga contendo uma matriz extracelular rica em laminina ou lrECM. A laminina é um componente estrutural presente em abundância no cérebro.

Mantenha o tubo no gelo para evitar a polimerização do IrECM.

Adicione células tumorais cerebrais e misture bem para garantir uma distribuição uniforme das células.

Em seguida, transfira a mistura para formas de parafilme, formando gotículas.

Incubar para facilitar a polimerização do lrECM para formar um andaime, imitando o ambiente natural das células.

Agora, lave os organoides solidificados em uma placa de Petri contendo um meio de cultura e incuba.

O meio de cultura fornece nutrientes essenciais e fatores de crescimento, apoiando a divisão celular.

Dentro do organoide, as células se auto-organizam migrando e invadindo.

Após a incubação, incline a placa para assentar os organoides.

Remova cuidadosamente o excesso de meio e adicione meio fresco.

Incubar com agitação suave.

Isso distribui os nutrientes uniformemente e aumenta o crescimento do organoide.

Para fazer organoides a partir de uma suspensão de célula única, adicione uma quantidade apropriada de matriz extracelular rica em laminina ou lrECM em um pequeno