Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 4:08 min. • July 8th, 2025
Comece com colônias de células-tronco pluripotentes induzidas por humanos cultivadas em uma matriz de membrana basal aderente.
Adicione um meio de diferenciação cerebelar contendo um hormônio específico, fator de crescimento e inibidores de moléculas pequenas.
Levante as colônias usando uma pipeta de vidro e transfira-as para uma placa de fixação ultrabaixa.
A superfície de baixa inserção mantém as células em suspensão, facilitando sua agregação em corpos embrióides tridimensionais, ou EBs.
O hormônio, o fator de crescimento e os inibidores se ligam aos seus respectivos locais-alvo, promovendo a diferenciação das células-tronco em progenitores neuronais.
Transfira os EBs para poços de placa de cultura revestidos com um polímero sintético e uma proteína de adesão para facilitar a fixação do EB.
Substitua o meio por um meio de diferenciação sem inibidores.
As células começam a migrar para fora dos EBs, formando uma monocamada 2D.
Remova o meio e adicione um meio de maturação cerebelar.
Os fatores de crescimento no meio induzem a maturação de progenitores neuronais em precursores neuronais cerebelares distintos.
No dia zero, adicione 1 mililitro de meio de diferenciação cerebelar supl
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