Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 4:22 min. • July 8th, 2025
Trate o tecido embrionário do mesencéfalo, rico em neurônios dopaminérgicos em desenvolvimento, com uma solução de tripsina-EDTA para separá-los da matriz tecidual.
Adicione um meio de desativação para inibir a atividade enzimática e, em seguida, lave para remover as enzimas residuais.
Pipete o tecido repetidamente. Os neurônios embrionários possuem menos projeções, reduzindo o estresse durante esse distúrbio e gerando uma suspensão unicelular.
Centrifugue e remova o sobrenadante e, em seguida, ressuspenda os neurônios em um meio completo. Transfira esses neurônios para uma lamínula revestida de polímero para fixação celular.
Coloque a lamínula em uma placa de vários poços com um meio completo, fornecendo nutrientes e fatores de crescimento essenciais para o crescimento dos neurônios.
Os antibióticos no meio impedem o crescimento bacteriano, apoiando a viabilidade neuronal.
À medida que os neurônios crescem e amadurecem, eles desenvolvem projeções celulares, como axônios e dendritos, formando conexões sinápticas.
Periodicamente, remova metade da mídia usada para eliminar subprodutos tóxicos.
Adicione um meio fresco para a manutenção a longo prazo dos neurônios dopaminérgicos.
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