Diferenciação de células-tronco neurais em neurônios usando um dispositivo microfluídico compartimentado

Pegue um dispositivo microfluídico que consiste em poços reservatórios conectados a dois compartimentos, um somático e um axonal, separados por uma barreira de microranhuras.

Os compartimentos e microranhuras são revestidos com um substrato de cultura de células para facilitar a adesão celular.

Adicione um meio de células-tronco neurais a cada poço e incube para pré-condicionar o dispositivo para cultura de células.

Descarte a mídia. Adicione células-tronco neurais, ou NSCs, aos poços do compartimento somático e permita que as células adiram.

Adicione o meio NSC a cada poço e incube em uma câmara umidificada para evitar a evaporação do meio. Durante a incubação, os NSCs proliferam.

Substitua o meio NSC por um meio de diferenciação neural e incuba.

As pequenas moléculas no meio induzem a diferenciação de NSCs em neurônios dentro do compartimento somático, com seus axônios se estendendo através dos microsulcos para o compartimento axonal.

Os neurônios diferenciados com axônios estendidos estão prontos para novos ensaios.

Para começar, dissolva a poli-l-ornitina em água destilada de grau de cultura de células para fazer 600 microlitros de solução por chip. Aspire o PBS restante dos po