Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 3:49 min. • July 8th, 2025
Comece com um músculo da cabeça de rato e corte-o em fragmentos.
Adicione um coquetel de enzimas proteolíticas e incube com agitação suave.
As enzimas digerem a matriz extracelular do tecido, afrouxando as fibras musculares.
Adicione meios contendo proteínas séricas para inativar as enzimas.
Transfira o tecido para um tubo, centrifugue e descarte o sobrenadante.
Ressuspenda o tecido em meio. Repita a interrupção mecânica e a centrifugação duas vezes para obter uma suspensão homogênea de células satélites - células-tronco cruciais para o reparo e regeneração muscular.
Colete o sobrenadante contendo células satélites.
Passe por um filtro de célula para obter uma suspensão de célula única. Centrifugue, descarte o sobrenadante e ressuspenda as células no meio.
Coloque gotas da suspensão celular em poços de lâmina de câmara revestidos de proteína de matriz extracelular.
A superfície revestida facilita a fixação das células satélites. Adicione mídia aos poços.
Os fatores de crescimento no meio induzem a proliferação e diferenciação de células satélites em mioblastos - precursores de células musculares, que proliferam e se fundem para formar miotubos multinucleados.
Os miotubos eventualme
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