Isolando dobras neurais cranianas de um embrião de pintinho para uma cultura de células da crista neural

Pegue um embrião de pintinho apoiado em uma moldura de papel de filtro e posicione-o sob um microscópio de dissecação.

Remova a membrana vitelina, uma camada protetora ao redor do embrião.

Identifique as dobras neurais do mesencéfalo localizadas posteriormente aos lobos ópticos e anteriores ao crescente cardíaco, o precursor embrionário do coração maduro.

As dobras neurais contêm células da crista neural pré-migratórias, que são células-tronco multipotentes que se transformam em células migratórias durante o desenvolvimento.

Essas células migratórias se diferenciam em células neuronais e não neuronais.

Extirpar o aspecto mais dorsal das pregas neurais e transferir o tecido para uma placa de cultura contendo tampão.

Em seguida, coloque lamínulas revestidas com uma proteína de adesão em poços de placa de cultura contendo meio.

Transfira as dobras neurais para as lamínulas revestidas. Incubar para facilitar a fixação do tecido.

Durante o cultivo, as células migratórias da crista neural emergem das dobras neurais para a superfície revestida, estabelecendo uma cultura de células da crista neural.

Transfira um embrião para um prato limpo contendo a solução de Ringer. Agite suavemente o e