Isolando neurônios do gânglio vestibular de um ouvido interno de camundongo

Pegue metade da cabeça de um filhote de rato e remova o cérebro.

Corte a parte superior do crânio e excise o tecido circundante para visualizar a cápsula ótica, uma camada externa óssea que protege as estruturas do ouvido interno.

Transfira o tecido para uma placa de cultura contendo um meio tamponado.

Separe os gânglios vestibulares superior e inferior, que contêm os corpos das células nervosas vestibulares.

Raspe a crista óssea e colha o gânglio superior subjacente.

Transferir o gânglio superior para uma nova placa contendo o meio tamponado.

Remova os tecidos aderentes da superfície para limpar o gânglio isolado.

Colocar o gânglio numa solução contendo enzimas proteolíticas.

As enzimas degradam a matriz extracelular do tecido, afrouxando as células.

Transferir o gânglio para uma placa com fundo de vidro revestido a polímero contendo meio de cultura e dissociar mecanicamente o tecido para libertar as células.

Incubar, permitindo que as células adiram e estabeleçam uma cultura de neurônios do gânglio vestibular.

Retire o cérebro do camundongo sacrificado usando uma tesoura cirúrgica fechada. Corte e remova o nervo craniano para separar completamente o cérebro do crânio. Começando n