Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 7:57 min. • July 8th, 2025
Pegue uma rata grávida transgênica e remova cirurgicamente o útero com embriões contendo neurônios motores marcados com fluorescência.
Transfira o útero para um prato com um tampão gelado sob um microscópio de fluorescência.
Use luz visível para isolar os embriões.
Remova a face e a cauda dos embriões e oriente-os para uma posição prona.
Usando o sinal de fluorescência, faça uma incisão no mesencéfalo para expor os núcleos oculomotor e troclear, que contêm neurônios motores.
Isole o mesencéfalo que contém os núcleos.
Abra o lado dorsal do rombencéfalo e da medula espinhal. Isole a medula espinhal, extirpe ambas as extremidades e colete as colunas contendo neurônios motores espinhais.
Trate os tecidos coletados com enzimas para dissociar a matriz tecidual. Colha as células individuais e isole os neurônios marcados com fluorescência usando FACS.
Adicione um meio de cultura aos neurônios isolados, transfira as células para uma microplaca revestida com substrato de cultura e incuba, permitindo que as células adiram e cresçam.
Mantenha os neurônios motores em cultura.
Comece colhendo embriões positivos para EGF Islet-1 de uma rata grávida aproximadamente 11,5 dias após a fertilização. P
Veja a transcrição completa e aceda a milhares de vídeos científicos