Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 6:26 min. • July 8th, 2025
Comece com uma placa de poço de baixa fixação contendo células-tronco pluripotentes induzidas por humanos ou iPSCs em um meio de células-tronco suplementado com um inibidor de Rho-quinase.
Os inibidores entram nas células, bloqueiam as enzimas Rho-quinase e mantêm a viabilidade celular. Isso promove a formação de agregados iPSC.
Substitua o meio por um meio de células-tronco para permitir que os agregados cresçam. Transfira-os para uma placa de cultura de baixa fixação com um meio de indução cortical.
Os componentes desse meio fazem com que as iPSCs se diferenciem em células neuroectodérmicas, um precursor neural.
Transfira cada agregado neuroectodérmico para um filme com poços rasos.
Substitua o meio por uma matriz de membrana basal e incube para permitir a solidificação da matriz e o aprisionamento dos agregados.
Transferir estes agregados incorporados na matriz para uma placa contendo um meio de indução cortical e incubar com agitação.
Com o tempo, as células neuroectodérmicas utilizam os fatores de diferenciação e se desenvolvem em células neuroepiteliais.
Mude o meio para um meio de diferenciação organoide, que permite que as células amadureçam em tipos de células mais especia
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