Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 4:52 min. • July 8th, 2025
Pegue um segmento do intestino delgado de camundongo previamente despojado do músculo longitudinal e do plexo mioentérico, camadas contendo neurônios entéricos e células gliais.
Corte o tecido e coloque-o em um tampão contendo EDTA. Incubar com balanço.
O EDTA interrompe as junções célula-célula, descolando a mucosa epitelial da lâmina própria subjacente e da submucosa, camadas de tecido conjuntivo contendo células gliais entéricas.
Pipete repetidamente para desalojar as células epiteliais.
Filtre através de um filtro de célula e descarte o fluxo.
Transfira o tecido para um tampão de dissociação não enzimático e incube-o com balanço. O tampão de dissociação solta a lâmina própria e a matriz extracelular submucosa, desprendendo as células.
Pipete repetidamente para dissociar ainda mais as células.
Filtre através de um filtro de células para coletar as células.
Centrifugue e ressuspenda as células em um tampão.
Pegue poços revestidos de proteínas de adesão contendo um meio de crescimento glial e coloque as células em placas.
O revestimento facilita a adesão celular, enquanto os fatores de crescimento promovem seletivamente a proliferação de células gliais, estabelecendo uma lâmina pr
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