Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 3:28 min. • July 8th, 2025
Comece com uma argamassa de vidro frio contendo tecido cerebral cortical de rato, que é a camada mais externa do cérebro.
Adicione um tampão de microvasos cerebrais ou BMB, contendo inibidores de protease.
Agora, mova o pilão para cima e para baixo para dissociar o tecido.
Essa agitação libera as unidades neurovasculares, ou NVUs, compreendendo microvasos, pericitos, neurônios e células gliais. Os inibidores de protease bloqueiam as proteases liberadas, protegendo os microvasos.
Transfira esta mistura para um tubo.
Adicione uma solução densa de polissacarídeo. Use um vórtice para misturar a solução com outros conteúdos uniformemente.
centrifuga. Os polissacarídeos densos permitem a sedimentação de NVUs, que são mais densas que os detritos teciduais.
Descarte o sobrenadante e ressuspenda as NVUs em BMB contendo inibidor de protease e solução de polissacarídeo.
Use o vórtice para misturar o conteúdo.
Repita o processo de centrifugação. Descarte o sobrenadante para remover quaisquer detritos residuais.
Ressuspenda as NVUs no BMB e armazene-as para análise posterior.
Coloque o tecido cerebral cortical em uma argamassa de vidro gelada. Em seguida, adicione 5 mililitros de BMB com coquet
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