Preparação de fatias colículo-talamocorticais de um cérebro de filhote de camundongo

Coloque o cérebro de um filhote de rato em uma lâmina com o lado dorsal voltado para cima.

Apare a frente do cérebro e reposicione-a na superfície plana criada.

Alinhe a superfície dorsal e a linha média do cérebro na lâmina. Corte em um ângulo para alinhar as estruturas auditivas conectadas do mesencéfalo e do prosencéfalo. Essas estruturas são o colículo inferior ou IC, corpo geniculado medial ou MGB, núcleo reticular talâmico ou TRN e córtex auditivo ou AC.

Prenda a superfície cerebral cortada angularmente em um estágio de amostra de vibratomo com blocos de ágar, garantindo que o rombencéfalo esteja apoiado no bloco mais fino.

Transfira o stage para o vibratomo e adicione um buffer para evitar danos aos tecidos.

Comece a fatiar para localizar o IC, MGB, TRN e AC.

Recupere a fatia contendo as regiões conectadas, denominada fatia colículo-tálamo-cortical, e transfira a fatia para uma câmara de retenção para preservar a viabilidade do tecido.

Para preparar a etapa de corte para fatiar, corte um pequeno pedaço de ágar 3% de aproximadamente 1 centímetro cúbico para ser usado como um batente para o cérebro, e outro pedaço de 1,5 centímetro por 1,5 milímetro por 3 milímetros para ser u